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GE percoll細(xì)胞分離液17-0891-01幾大要素
點(diǎn)擊次數(shù)：1743 發(fā)布時間：2018-5-8
GE percoll細(xì)胞分離液17-0891-01幾大特點(diǎn)：
特點(diǎn)一：Percoll為低粘度的密度梯度介質(zhì)，用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和較大的病毒分子。粘度低，因此使用低的離心力（200-1000× g），只需幾分鐘就可形成梯度對細(xì)胞進(jìn)行分離。Percoll供貨時已經(jīng)消毒，并且易于再次消毒。包裝于易打開，并可再次密封的250ml和1升瓶中。
特點(diǎn)二：1、在溫和的條件下，分離細(xì)胞、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和較大的病毒分子(可小至~70S)，保持其存活和形態(tài)的完整性
2、對細(xì)胞無毒性
3、可調(diào)整到生理狀態(tài)下的離子強(qiáng)度和pH
4、使用角轉(zhuǎn)頭，以中速離心，即可形成梯度
5、等滲梯度，密度zui大可達(dá)到1.3 g/ml。
特點(diǎn)三：操作簡單：1.不同濃度(密度)Percoll溶液的制備: 先用9份Percoll與1份8.5％ NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
Percoll濃度(％) 70 60 50 40 30 20
比重g／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤，除去多余血清，這種預(yù)處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下，使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時，可將Percoll液放入注射器中，小針頭斜面緊貼管壁，任其自然慢慢流下。
3.裝樣：樣品體積和細(xì)胞濃度根據(jù)不同細(xì)胞而異，一般加樣體積不宜過大，細(xì)胞濃度也不可過高，否則會影響細(xì)胞的分離和回收。
4.離心：一般采用離心力為400g，時間20～25min。由于多層Percoll之間密度差別不大，因此離心機(jī)加速、降速時要慢，要平穩(wěn)。
5.取樣：當(dāng)所要分離的細(xì)胞絕大部分在兩層的界面時，可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細(xì)胞;有時大部分細(xì)胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細(xì)胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。